Lenti慢病毒载体构建

慢病毒-CRIPSR敲除(L1系列CRISPR-SpCas9)
SpCas9是第一个被鉴定的CIRSPR-Cas9系统,目前应用最广,基因长4.2Kb。
特 点:
- 使用经过优化的sgRNA scaffold,能提高切割效率约40%
- 带Puro筛选标记,可经筛选得到稳定细胞株
- SpCas9定制sgRNA长度:18-20nt
载体编号 | 启动子 | 基因 | (Sp)sgRNA | 筛选标记 |
XL01A | EFS(广谱) | SpCas9 | U6启动子 | Puro |

慢病毒-shRNA敲除(L2系列shRNA)
派真生物L2系列病毒入口载体可定制克隆您的靶标序列shRNA,用于高效敲除培养细胞中靶基因水平。可形成发夹结构的shRNA可在U6或H1启动子驱动下表达,并同时用CMV/EF1a等启动子驱动表达GFP绿色荧光蛋白作为跟踪蛋白。
特点:
- EGFP、mCherry荧光蛋白作为跟踪蛋白
- 灵活定制克隆,可表达多个shRNA
载体编号 | 启动子 | 基因 | (Sp)sgRNA |
XL01B | U6启动子 | CMV | CopGFP |
XL02B | H1启动子 | CMV | CopGFP-2A-Puro |
XL03B | U6启动子 | EF1a | EGFP-2A-Neo |
XL04B | U6启动子 | CMV | CopGFP-2A-Puro |
XL05B | U6启动子 | CMV | Puro |
XL06B | U6启动子 | PGK | Puro.IRES.mCherry |
XL07B | H1启动子 | CMV | CopGFP |
XL08B | H1启动子 | CMV | CopGFP-2A-Puro |
XL09B | H1启动子 | CMV | Puro |
XL012B | U6启动子 | CMV | Neo |

客户需要提供的材料:
提供sgRNA靶向基因序列及所需的派真载体编号,由派真生物进行靶点设计、图谱制作和载体构建。(若靶点未经验证,建议多选择2-3个候选靶点)
提供sgRNA靶向基因序列及所需的派真载体编号,由派真生物进行靶点设计、图谱制作和载体构建。(若靶点未经验证,建议多选择2-3个候选靶点)
*派真生物设计干扰位点实行3保1政策:在目的细胞转染效率达到百分之九十(70%-90%)的前提下,针对编码基因,三个干扰序列里面保证一个mRNA水平达到70%或以上,蛋白水平不作任何保证;针对非编码基因,不承诺干扰效率;在此条件下,若三个干扰序列在mRNA水平都没有效果,甲方提供原始数据后,乙方再为甲方免费设计两个序列。
慢病毒基因过表达(L3系列)
派真生物L3系列病毒入口载体可定制您的目的基因,用于过量表达实验。
成熟高效表达载体,适应多种实验设计
可用GFP、mCherry、Puro、Neo等作为筛选标记
特点:
载体编号 | 外源启动子 | 建议基因容量 | 启动子 | 筛选标签 |
XL01C | CMV | 5Kbp | 无 | 无 |
XL02C | CMV | 4Kbp | PGK | Puro |
XL03C | CMV | 3.3Kbp | EFI | CopGFP-2A-Puro |
XL04C | CMV | 4Kbp | EFI | mCherry |
XL05C | CMV | 4Kbp | IRES | Neo |
XL06C | CMV | 4Kbp | EFI | CopGFP |
XL07C | CMV | 4.3Kbp | 无 | 2A-Neo |
XL08C | EFI | 3.3Kbp | CMV | CopGFP-T2A-Puro |
XL09C | EFI | 3.2Kbp | CMV | C-3xFlag、CopGFP-T2A-Puro |
XL10C | CMV | 4Kbp | EFI | mRuby2 |
XL11C | CMV | 4Kbp | EFI | mCitrine |
XL12C | CMV | 4Kbp | EFI | EYFP |
XL13C | CMV | 4Kbp | EFI | Neo、CopGFP |
XL14C | CMV | 3.3Kbp | EFI | EYFP |
XL15C | CMV | 2.7Kbp | EFI | C-3xFlag 、CopGFP-2A-Puro |
XL16C | EFI | 3.2Kbp | CMV | N-3xFlag CopGFP-2A-Puro |
XL17C | EFI | 3.9Kbp | CMV | C-3xFlag、CopGFP |
XL18C | CMV | / | C-3xFlag、Puro | |
XL19C | CMV | / | dTomato-T2A-Puro | |
XL20C | CMV | / | CopGFP | |
XL21C | CMV | / | CopGFP-T2A-Puro | |
XL22C | CMV | EFI | MCherry-2A-Neo |