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Lenti慢病毒包装 – 科研级

慢病毒是逆转录病毒的一种,它需要相对较长的孵育时间,所以称之为“慢”病毒。它包括人免疫缺陷病毒(HIV)、猫免疫缺陷病毒(FIV)、猿免疫缺陷病毒(SIV)、牛免疫缺陷病毒等,其中研究最多的是HIV-1慢病毒。

慢病毒载体是以慢病毒基因组为基础,由所需的目的基因取代部分基因构建而成。目前使用的慢病毒载体多采用HIV-1基因组改造而来。与一般的逆转录病毒载体相比,慢病毒载体对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力而具有更广的宿主范围。在感染能力方面可以有效感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞,又很少引发机体免疫反应。慢病毒载体还可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而实现更持久的表达。派真生物提供的慢病毒为“自杀”性病毒,即病毒感染目的细胞后不会再感染其他细胞,也不会利用宿主细胞产生新的病毒颗粒。慢病毒中的毒性基因已经被剔除并被外源性目的基因所取代,属于假型病毒。但该病毒仍然具有潜在的生物学危险,建议不要使用编码已知可能会致癌或有毒性的基因的假型病毒,除非已经完全公认某个基因肯定没有致癌性,否则不建议采用假型病毒进行生物学实验。派真生物生产的慢病毒外壳蛋白为VSVG,可广谱感染绝大部分细胞。

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如果客户自身的载体从未取得过正常滴度,为确保生产顺利、节约实验时间,建议使用派真入口载体进行重新克隆。派真生物拥有具备多年克隆经验的技术人员,采用最高效的克隆技术,通常只需一步克隆,周期5-8工作日。派真生物将质粒进行转化、超大量提取,再用于三质粒共转染293T细胞生产高纯高滴度慢病毒。

慢病毒服务说明

客户委托派真生物生产的病毒不能携带有剧毒性、致癌性或传染基因。若客户的病毒含剧毒性或致癌基因带来任何法律后果,派真生物概不负责。
派真生物所有生产步骤严格执行标准操作,按目前的生产记录显示,针对不同产量要求来计划生产规模。在第一轮慢病毒生产过程中,95%的情况下,都会超出预期产量。如果整个生产过程正常情况下包装总量低于1E+8TU,意味着质粒包装能力属低产量或不适宜生产的范畴。导致低产的可能原因包括:
  • 质粒的插入片段过大
  • 表达了影响包装的基因
  • 质粒已经存在影响包装的突变
对于这种情况,派真生物会第一时间与客户沟通,客户可以选择马上交付病毒;也可以选择重复一次相同规模生产,最后一次性把两次生产总量一起交付。

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